光漂白
光漂白(英语:Photobleaching,亦称为光致褪色)是一个对萤光团的光化学破坏。在显微术中,光漂白使得观测变得很复杂,因为它会造成破坏,使萤光团无法继续放光。此现象造成间歇性拍摄光谱(time-lapse microscopy)观测上的干扰。
然而,光漂白也提供了些应用在quench自发荧光上(主要在antibody-linked)。这可以帮助提高信噪比signal-to-noise ratio。
光漂白也用来研究分子运动和分子扩散现象,像是FRAP或FLIP技术。
我们可以借着控制光的强度以及照射时间,来进而控制光漂白的现象。或是使用结构较强的萤光团来减少光漂白的现象(例: Alexa Fluors 或 DyLight Fluors)。一个适当让萤光分子被破坏的方法是固定条件(强度x照射时间x循环次数),因为在固定这些条件下,每次吸收放光循环有相同的光漂白期望值。
生命期
生命期取决于物质的不同。 不同染剂在不同数量的光子照射下会有不同的生命期(例:在105 photons/s):
请小心这里说的"生命期"与一般在序书萤光基团的"生命期"并不相同,一般萤光基团的生命期可以参考荧光寿命成像。
外部链接
- Introduction to Optical Microscopy[永久失效链接] an article about 光漂白
- Viegas MS, Martins TC, Seco F, do Carmo A. An improved and cost-effective methodology for the reduction of autofluorescence in direct immunofluorescence studies on formalin-fixed paraffin-embedded tissues. Eur J Histochem. 2007, 51 (1): 59–66. PMID 17548270.