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TBE缓冲液

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TBETris/Borate/EDTA,是一种缓冲液,含有三羟甲基氨基甲烷(Tris)、硼酸,和EDTA

在分子生物学上,TBE和TAE英语TAE buffer经常用于溶解核酸,最常见于电泳实验。由于Tris类的缓冲液皆呈弱碱性,因此可将DNA脱除氢离子而有带电性,更容易溶于水中。EDTA则是一种双价阳离子螯合剂,特别是对离子(Mg2+)。由于核酸酶需要这些离子,EDTA可以将这些离子牢牢抓住,避免核酸降解。但要注意的是,镁离子同时是很多酵素的辅助因子,如限制酶DNA聚合酶等等,因此EDTA的浓度一般不会太高(通常在1mM左右)。

近期研究显示,TBE和TAE在电泳中是可以互相置换的[1]

配方(1公升,5倍浓度贮存液)

  • 54 g 的Tris (CAS# 77-86-1)
  • 27.5 g 的硼酸(CAS# 10043-35-3)
  • 20 ml 的 0.5 M EDTA (CAS# 60-00-4) (pH 8.0)

盐酸pH值调整至8.3[2]

TBE贮存液在进行电泳之前需将浓度稀释为适当浓度。

参见

参考文献

  1. ^ Brody, J.R.; Kern, S.E. History and principles of conductive media for standard DNA electrophoresis (PDF). Anal Biochem. 2004, 333 (1): 1–13 [2015-09-05]. doi:10.1016/j.ab.2004.05.054. (原始内容 (PDF)存档于2012-12-24). 
  2. ^ 存档副本 (PDF). [2015-09-05]. (原始内容存档 (PDF)于2016-03-04).